摘要:目的探讨原核表达肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)对人类嗜中性粒细胞释放CXCL8的影响。方法将重组质粒pET-32a(+)/PspA转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导重组菌表达TRx-His-PspA融合蛋白并纯化;通过肠激酶切掉融合蛋白的TRx-His部分,获得PspA蛋白。用PspA蛋白免疫小鼠,获得抗PspA抗体。再将PspA蛋白加入到人类嗜中性粒细胞的培养基中共孵育,检测CXCL8释放水平的差异;最后,用抗PspA抗体检测其对PspA蛋白促人类嗜中性粒细胞释放CXCL8的影响。结果中性粒细胞细胞内合成和释放到培养基上清液的CXCL8显著增加(P〈0.05);而加入了抗PspA抗体后,PspA蛋白刺激人中性粒细胞释放CXCL8的能力明显减弱。结论 PspA可以上调人类嗜中性粒细胞趋化因子CXCL8的合成和释放,揭示了中性粒细胞和肺炎链球菌致病因素之间的关系。
关键词:链球菌 肺炎 膜蛋白质类 中性粒细胞 cxcl8
单位:重庆医科大学病原生物学教研室 400016 重庆建设医院药剂科 400050 重庆三峡中心医院儿童分院儿内科 404000 重庆医科大学附属第一医院检验科 400016
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