摘要：目的构建含大鼠降钙素相关基因肽（CGRP）基因的慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞并研究CGRP的功能奠定基础。方法通过基因工程技术将CGRP基因克隆到穿梭质粒中，构建Puc57-CGRP质粒，用双酶切法构建慢病毒表达载体（pLenO-DCE—CGRP），将该质粒载体与4种辅助包装质粒共转染293T细胞，转染的293T细胞继续培养48h后，收集其上清液，浓缩得到高滴度的慢病毒液，然后采用倍比稀释法和流式细胞术检测病毒滴度，并通过实时定量聚合酶链反应（PCR）检测293T细胞中CGRP基因的表达。结果成功构建了pLenO-DCE—CGRP的重组慢病毒载体，滴度为5．1×10^8TU／mL。结论成功构建了含cGRP基因高滴度的慢病毒载体，为后续转染间充质干细胞（MSC）并研究cGRP的功能奠定了基础。

关键词：降钙素基因相关肽 慢病毒属 dna 重组 

单位：遵义医学院附属医院心血管内科 贵州遵义563000