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大鼠Tmubl基因过表达慢病毒载体的构建

赵晓彪 李光耀 刘孟刚 范霞 陈平 重庆医学 2016年第13期

摘要:目的构建Tmubl基因的过表达慢病毒载体(LV—Tmubl),为研究Tmubl蛋白在肝细胞增殖过程中的作用提供实验材料。方法化学合成Tmubl基因序列,用BamHI/AgeI酶切化学合成含有目的基因的质粒及GV287载体,PCR产物连接入线性化表达的载体。PCR鉴定引物,再对PCR鉴定阳性的克隆进行DNA测序和比对分析。使用构建的LV—Tmnbl,转染293T细胞,荧光法检测构建的慢病毒滴度。结果成功构建了LV-Tmubl,并获得相应的病毒,病毒滴度为2×10^8TU/mL。结论LV-Tmubl为进一步研究Tmubl蛋白在肝细胞增殖中的作用提供了实验基础。

关键词:tmubl基因过表达慢病毒载体大鼠

单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆外科 重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室 重庆400042

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