摘要:目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制,为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞(HKC)为研究对象,采用不同浓度的姜黄素(0、0.780、1.563、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000p.mol/L)刺激HKC72h,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响;应用不同浓度TGF-β1(0、1、5、10ng/mL)单独或联合姜黄素(6.250、12.500、25.000、50.000μmol/L和100.000μmol/L)共同刺激HKC细胞72h,观察细胞形态变化,应用逆转录PCR(RT-PCR)检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果HKC贴壁生长,呈铺路石样外观。姜黄素刺激对细胞形态无影响;TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化,且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加(P〈0.05,P〈0.01);MTT结果显示:姜黄素在3.125-25.000μmol/L浓度范围内,能显著促进HKC增殖(P〈0.05,P〈0.01);姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变,以12.500-50.000μmol/L的姜黄素作用最明显,同时,下调TGF-β1基因和蛋白的表达,相反上调BMP-7基因和蛋白表达,并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降(P〈0.05,P〈0.01)。结论姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型,能对抗TGF-β1诱导的HKc向梭形细胞转化,抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达,而促进BMP-7表达。
关键词:肾疾病 纤维化 转化生长因子8 姜黄素
单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室; 重庆400042; 第三军医大学西南医院肾内科; 重庆400038
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