摘要：目的构建高滴度大鼠Hesl腺病毒干扰载体（Ad—Hesl—shRNA）。方法设计3对Hesl—shRNA寡核苷酸序列，通过定向克隆构建pHBAd—U6-CMV-Hesl-shRNA干扰质粒，将pHBAd—U6-CMV-Hesl-shRNA和pHBAd—BHG共转染293T细胞，以包装Ad—Hesl—shRNA，利用改进TCID50法进行病毒滴度测定。Ad—Hesl感染H9c2心肌细胞，Western blot检测Hesl表达。结果pHBAd—U6-CMV-Hesl—shRNA构建成功，Ad-Hesl—shRNA包装顺利，滴度为1．0×10^11PFU／mL，并可在H9c2心肌细胞内发挥干扰效应。结论Ad-Hesl-shRNA包装成功，在一心肌细胞中具有Hesl的干扰效应。

关键词：腺病毒科 rna干扰 寡核苷酸序列分析 hesl 质粒构建 

单位：南昌大学第一附属医院心脏大血管外科; 南昌330006