摘要：目的 研制一种能够表达hCD4和hCCR5基因的骨髓间充质干细胞（MSCs）模型,以应用于Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）研究。方法 构建PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR慢病毒载体,按最佳感染复数转染MSCs,荧光定量PCR检测hCD4和hCCR5的mRNA的表达,免疫印迹法检测MSCs中hCD4和hCCR5蛋白的表达,免疫荧光法检测hCD4和hCCR5荧光的表达;将建立的MSCs细胞进行HIV-1感染后,PCR检测HIV RNA的表达。结果 MSCs经转染慢病毒载体后,hCD4和CCR5mRNA凝胶电泳可见193bp和75bp的阳性条带,mRNA的qRT-PCR检测可见其表达升高（P〈0.01）;Western blot检测可见55.0×10^3（hCD4）和40.6×10^3（hCCR5）的阳性条带;免疫荧光成像可见存在CD4和CCR5的荧光表达,而空载慢病毒载体呈阴性。转染后MSCs细胞感染HIV-1后在培养细胞与上清液中HIV-1RNA均显著升高（P〈0.05）。结论 成功建立了高效表达hCD4/CCR5蛋白的骨髓间充质干细胞模型,具备对HIV-1易感的特性,可应用于HIV的发病机制、抗病毒、疫苗开发等研究。

关键词：骨髓间充质干细胞 细胞模型 基因表达 

单位：广东医科大学附属龙华中心医院; 深圳518110; 桂林医学院生物技术学院; 桂林541004; 中山大学生命科学院; 广州510275; 广州中医药大学热带医学研究所; 广州510405; 桂林医学院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室; 桂林541004