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大豆抗逆基因GmDREB3启动子的克隆及调控区段分析

孙啸; 董建辉; 陈明; 徐兆师; 叶兴国; 李连城; 曲延英; 马有志 作物学报 2008年第08期

摘要:GmDREB3基因能提高转基因烟草和拟南芥的抗逆性。利用SiteFinding—PCR技术,从大豆品种铁丰8号基因组中分离到大豆抗逆基因GmDREB3启动子片段,长度1648bp。该片段富含A/T碱基,还含有TATA—box、低温响应元件MYC及其他顺式元件MYB、CAAT-box等。将该启动子分区段与GUS报告基因连接构建表达载体,利用基因枪法转化小麦愈伤组织,并进行干旱、高盐、低温等处理,通过组织化学染色和GUS荧光定量测定分析各区段调控元件的活性。结果表明,在干旱和低温的诱导下,该启动子能激活下游GUS基因的表达,在-285~-1117区域存在与低温和干旱应答有关的重要调控元件,在-1464~-1648区域内存在抑制启动子活性的调控元件。由此推断,在逆境条件下通过启动子区域正、负调控元件的共同作用,使GmDREB3基因的表达维持在一个恰当的水平。

关键词:干旱应答元件结合蛋白质启动子顺式作用元件瞬时表达

单位:中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室; 北京100081; 新疆农业大学农学院; 新疆乌鲁木齐830052; 西北农林科技大学农学院; 陕西杨凌712100

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