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大豆(Glycine max)GmDREB5互作蛋白GmGβ1的筛选及鉴定

于月华; 陈明; 李连城; 徐兆师; 刘阳娜; 曲延英; 曹新有; 马有志 作物学报 2008年第10期

摘要:从大豆(Glycinemax)中克隆了一个与抗逆相关的DREB(Dehydration Responsive Element Binding Protein)基因GmDREB5。功能分析证明,GmDREB5基因能够显著提高烟草的抗旱性和耐盐性。为了筛选GmDREB5的互作蛋白,采用酵母双杂交系统以GmDREB5蛋白73~226位氨基酸区段为诱饵筛选干旱处理的大豆cDNA文库,发现一个互作蛋白含有保守的WD40结构域,与棉花(Gossypium hirsutum)和水稻(Oryza sativa)的G蛋白β亚基分别具有61%和52%的同源性,说明蛋白可能是一类新的大豆G蛋白β亚基,将其定名为GmGβ1。将GmDREB5与GmGβ1共转化酵母菌株AH109,转化的酵母能够在四营养缺陷型培养基上(SD/trp^-leu^-his^-ade^-)正常生长,而对照不能生长;同时,共转化的酵母能够激活LacZ报告基因的表达,证明GmGβ1与GmDREB5之间存在相互作用。表达特性分析表明,GmGβ1基因受干旱、低温、高盐等胁迫和激素ABA处理的诱导而表达,证明GmGβ1不仅参与植物对非生物胁迫的响应,同时参与对GmDREB5蛋白水平的调控。

关键词:大豆dreb基因酵母双杂交系统互作蛋白

单位:新疆农业大学农学院; 新疆乌鲁木齐830052; 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室; 中国农业科学院作物科学研究所; 北京100081

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