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大豆立枯丝核菌G蛋白β亚基基因的克隆与分析

马炳田; 曲广林; 黄文娟; 林瑜凡; 李仕贵 作物学报 2009年第02期

摘要:由立枯丝核菌[Rhizoctonia solani Kiihn,有性世代:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]引起的大豆纹枯病(soybean sharp eyespot)是一种重要病害。G蛋白β亚基(guanine nucleotide binding proteinbeta-subunit)作为重要的信号传导因子,在植物病原菌致病分子机制中起着重要作用。为了解G蛋白β亚基基因的结构与功能,根据同源物种G蛋白β亚基相关序列设计引物,利用PCR和RT-PCR技术克降了大豆立枯丝核菌G蛋白β亚基的基因序列和开放阅读框(G-proteinbeta-subnnit of soybean Rhizoctoniasolani,简写为gbsrsl,GenBank登录号为EU663628)。该片段全长1864bp,含有4个内含子和5个外显子;开放阅读框(ORF)长1047bp,编码348氨基酸残基,与多种真菌G蛋白β亚基的氨基酸序列相似程度较高,达79.72%-99.43%;该蛋白质具有2个α-螺旋和7个β-折叠的二级结构,形成无规则卷曲连接的桶形三级结构。将gbsrsl的ORF连接于原核融合表达载体pGEX-4T-2中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达。gbsrsl的克隆和特性研究为了解大豆直枯丝核菌的致病机理、有效防治纹枯病奠定了基础。

关键词:大豆立枯丝核菌致病性信号传导

单位:四川农业大学水稻研究所; 成都温江611130; 四川农业大学/西南作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室; 四川雅安625014

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