摘要：低温是种子萌发过程中常见的自然灾害，在我国北方经常发生，导致种子萌发率较差、降低植株活力等后果。利用cDNA-AFLP技术从低温（4℃）吸胀24 h的抗低温吸胀大豆品种中黄22 （低温吸胀24 h对萌发率无影响的品种）中分离出一个基因片段，命名为GMCHI （GenBank No. EU699765），通过RACE方法得到全长为387 bp的cDNA序列。在NCBI数据库中的查询表明， GMCHI基因和数据库记录的基因序列同源性较低，因此可以断定GMCHI是在大豆中被发现的新基因。半定量RT-PCR显示GMCHI受ABA和PEG诱导。该基因与PET30A连接后转入原核细胞，经过IPTG诱导，6% SDS-PAGE电泳条带说明，GMCHI在大肠杆菌中能够表达。把诱导表达和非诱导表达的菌落在–20℃下2 h后，移至37℃培养20 d，发现对照的菌落完全死亡，而诱导表达GMCHI的菌落只有部分死亡，并长出新菌落。RT-PCR检测表明新菌落携带GMCHI基因，证明GMCHI基因在大肠杆菌中的表达提高了低温耐性。

关键词：大豆 gmchi 菌落 基因 低温 

单位：华中科技大学中英HUST-RRes基因工程和基因组学联合实验室; 教育部分子生物物理重点实验室; 生命科学与技术学院; 湖北武汉430074; 中国科学院植物研究所植物园; 北京100093; 孝感学院生命科学与技术学院; 湖北孝感432000