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棉属野生种旱地棉苏氨酸醛缩酶基因GarTHA的克隆及功能验证

范昕琦; 刘章伟; 冯娟; 徐鹏; 张香桂; 沈新莲 作物学报 2013年第11期

摘要:盐胁迫是影响作物生长和发育的重要因素之一。一些棉属野生种具有较好的耐盐性,是开展棉花耐盐性机制研究以及改良陆地棉耐盐性的重要资源。本研究基于cDNA—AFLP技术分离获得的旱地棉(Gossypiumaridum)盐胁迫下差异表达片段序列信息,经电子克隆技术和RT—PCR方法克隆了旱地棉苏氨酸醛缩酶基因cDNA全长,命名为GarTHA(GenBank登录号为KCl67360)。该cDNA全长为1018bp,包含一个822bp的完整ORF,编码273个氨基酸残基,蛋白质分子量为82.57kD,等电点为4.89。GarTHA基因与杨树PtTHA基因同源性最高,为84.6%。为进一步验证其功能,利用拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体,将GarTHA基因的完整ORF转入拟南芥中,获得转基因植株并进行了耐盐性鉴定。结果表明,在盐胁迫下转基因拟南芥种子的发芽率明显高于野生型,且转基因植株的根长显著高于野生型。说明GarTHA基因可能参与植物的盐胁迫反应,从而提高植物抗逆性。

关键词:旱地棉苏氨酸醛缩酶耐盐性结构特征功能分析

单位:江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室; 江苏南京210014

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