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籽粒苋AhNAD-ME的序列特征与表达

白云凤; 聂江婷; 张忠梁; 李平; 张维锋; 闫建俊; 冯瑞云; 张耀 作物学报 2014年第12期

摘要:NAD(P)-苹果酸酶催化苹果酸氧化脱羧,产生丙酮酸和CO2,伴随NAD(P)的还原。在C4植物中,苹果酸酶参与了C4光合作用。本研究对克隆的双子叶C4植物籽粒苋NAD-苹果酸酶基因(AhNAD-ME)编码的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明,AhNAD-ME具有苹果酸酶的完整功能域,包括苹果酸N端结构域和苹果酸酶的NAD结合结构域;进化树表明,该序列属于NAD-ME的α亚基,该亚基定位于线粒体基质中。半定量RT-PCR分析表明,该基因主要在叶片和茎中表达,表达量随光照时间延长而增加。将AhNAD-ME基因重组到原核表达载体pEASY-E1中,电击法转化到大肠杆菌Transette(DE3)菌株中,IPTG诱导其高效表达,表达的融合蛋白的分子量与预期相符,主要以包涵体形式存在。

关键词:籽粒苋序列特征表达模式原核表达

单位:山西省农业科学院作物科学研究所; 山西太原030032; 山西大学生物工程学院; 山西太原030006; 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室; 山西太原030006

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