摘要：以迎霜品种茶树基因组为模板，利用高保真聚合酶pfu，通过PCR方法扩增得到茶树PPO基因的编码区序列。通过设计酶切引物将其成功融合至真核表达载体pPICZa中，构建出茶多酚氧化酶的融合蛋白真核表达载体pPICZa-PPO，并将其转化进入巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）GSll5中，成功筛选出多个阳性转化子。对阳性转化子进行甲醇诱导，采用Western-Blotting方法在培养液中成功检测到诱导表达的目的蛋白。酶活检测结果也显示诱导产物具有较高的相对酶活性，能够正确发挥酶蛋白的生物功能。

关键词：茶树 多酚氧化酶 融合蛋白真核表达载体 巴斯德毕赤酵母 诱导表达 

单位：山东农业大学园艺科学与工程学院 山东泰安271018 作物生物学国家重点实验室 山东泰安271018