摘要:获得了一类茶树氧甲基转移酶基因cDNA全长并构建了该基因的原核表达载体。以从茶树叶片中提取的总RNA为模板,结合RT-PCR与RACE克隆技术获得氧甲基转移酶(O.methyltransferase)基因cDNA全长1280bp,其开放阅读框为1068bp,编码355个氨基酸,推测的蛋白分子量为39.1kD,理论等电点为5.68。其氨基酸序列与葡萄和蓖麻氧甲基转移酶基因相似性分别为73%、71%。将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21后诱导重组蛋白的表达,经IPTG诱导,SDS.PAGE检测到1条与预测融合蛋白分子量相符的外源蛋白。
关键词:茶树 氧甲基转移酶 克隆 原核表达
单位:中国农业科学院茶叶研究所/茶叶加工工程研究中心 浙江杭州310008
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