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茶树GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶基因cDNA全长的克隆与表达分析

肖瑶 周天山 李佼 张佳欣 余有本 茶叶科学 2015年第01期

摘要:抗坏血酸(Vc)是重要的抗氧化剂,在茶树体内的各种生理代谢及抵御非生物胁迫中起重要作用,Vc含量关系到绿茶品质优劣.GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)是茶树Vc生物合成途径中的关键酶之一.本研究通过RACE-PCR方法从茶树中克隆了GMP cDNA全长序列,共计1510 bp,其中包含1 086 bp的开放阅读框(ORF),编码361个氨基酸,推测蛋白分子量为39.599 kDa.BLAST分析表明,茶树GMP基因氨基酸序列与猕猴桃的亲缘性最高,达到96%.实时定量PCR分析表明,茶树新梢芽下第三叶中GMP基因表达量最高,嫩茎中最低,不同品种茶树新梢叶片中表达量存在明显差异.高温胁迫初期,GMP基因表达量及抗坏血酸含量迅速升高,然后逐渐下降且均低于同期对照.

关键词:茶树基因克隆表达分析

单位:西北农林科技大学茶叶研究所 陕西杨凌712100 汉中市农业科学研究所 陕西汉中723000

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