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盐生草Actin基因片段的克隆及表达

马艳红 徐先良 汪军成 任盼荣 杨柯 孟亚雄 李葆春 马小乐 王化俊 草业科学 2015年第09期

摘要:根据藜科植物的肌动蛋白(Actin)基因编码区保守序列设计一对简并引物,提取盐生草(Halogeton glomeratus)叶片的总RNA,运用RT-PCR技术扩增出Actin基因的核心序列并连接到pMD19-T载体,阳性克隆经PCR检测后进行测序。序列分析表明,盐生草Actin基因核心序列长度为598bp,编码198个氨基酸,并在GenBank中注册,登录号为KF699314,由盐生草Actin基因推导的氨基酸序列与其他几种耐盐植物的同源性均在94%以上,具有高度的保守性。采用荧光定量RT-PCR技术分析其Actin基因在盐生草不同器官的表达情况,结果显示其表达量恒定无差异,表明克隆的Actin基因可作为盐生草内参基因来研究其相关耐盐基因的表达。

关键词:盐生草肌动蛋白基因克隆序列分析

单位:甘肃省干旱生境作物学重点实验室/甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 甘肃兰州730070 甘肃农业大学农学院 甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院 甘肃兰州730070

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