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基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体

周奕阳; 李鹏; 谭之磊; 邓子新; 贾士儒; 欧竑宇 湖南农业大学学报·自然科学版 2019年第02期

摘要:鉴于ε-聚赖氨酸发酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素-抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε-聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因 relB2sca与ε-聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,并导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε-聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε-聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR-008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素-抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。

关键词:链霉菌表达载体质粒稳定性

单位:上海交通大学生命科学技术学院; 上海200230; 江西省科学院微生物研究所; 江西南昌330000; 天津科技大学生物工程学院; 天津300457

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