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核心蛋白聚糖在HepG2细胞中的表达及作用

张玉成 王雅丽 杜珍武 高申 吕俊峰 张桂珍 山东医药 2008年第07期

摘要:目的构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用。方法应用PCR技术扩增DCN全长基因cDN段,与pcDNA3.1载体连接,并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体,脂质体介导转染HepG2,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达。MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期。结果RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢,G1期细胞显著增多。结论本方法可成功建立稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能够抑制HepG2细胞株的生长。

关键词:核心蛋白聚糖聚合酶链反应转染hepg2

单位:吉林大学中日联谊医院 吉林长春130033 吉林大学第二临床医院

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