摘要：目的探讨深低温冷冻损伤导致细胞死亡的机制。方法用不同电解质及不同浓度的冷冻保护剂（OMSO）对人肝癌细胞株BEL-7402进行程序降温，至深低温后复苏。采用AnnexinV／PI荧光标记双染色、DNA-Prepstain荧光标记染色，流式细胞术分析冻存前后细胞凋亡、坏死、存活、细胞碎片及BEL-7402细胞周期变化。结果无冷冻保护剂时，冷冻后细胞坏死、碎片明显（P〈0．05）。随着离子和DMSO浓度的增加，冷冻后BEL-7402细胞凋亡更趋明显，但细胞坏死、碎片均不明显（P〉0．05）；冷冻前后细胞周期变化不显著（P〉0．05）。结论在冷冻过程中，胞内冰损伤和溶质损伤是导致细胞损伤的独立因素；前者引起细胞死亡的方式是坏死，后者（包括电解质与DMSO）是导致细胞凋亡。冷冻导致的细胞死亡元周期特异性。

关键词：低温损伤 细胞凋亡 细胞周期 

单位：中山大学附属第一医院 广州510080 山东大学附属省立医院 郑州大学第一附属医院