摘要：目的探讨适用于体外培养的乳腺癌MCF7细胞中肿瘤干细胞的鉴定模式。方法取人乳腺癌MCF7细胞株,在显微操作法的基础上改进单细胞分离种植技术,用该技术分离MCF7单细胞并种植到96孔板,观察单细胞克隆生长情况并依据其生长特征制订成瘤性克隆的纳入标准。随机扩增MCF7单细胞克隆并进行移植成瘤实验,观察符合成瘤性克隆纳入标准的单细胞克隆的成瘤性。结果成瘤性克隆的纳入标准：单细胞种植后1周即形成细胞数〉50个的克隆,细胞大小形态正常,大部分细胞状态良好;第2周时克隆迅速扩增至〉300个,甚至达1 000个以上,细胞状态好,克隆中心可有（或无）少量细胞凋亡。符合上述标准的单细胞克隆可以100%扩增成功并连续移植成瘤,而相应排除的克隆成瘤率〈10%。结论建立了乳腺癌MCF7单细胞分离种植—成瘤性克隆的干细胞鉴定模式,该模式适用于体外培养的肿瘤细胞株中肿瘤干细胞的鉴定。

关键词：肿瘤干细胞 克隆细胞 肿瘤细胞 乳腺癌 

单位：广西医科大学 南宁530021 广西医科大学第一附属医院