摘要：目的构建人类疱疹病毒8型（HHV-8）基因质粒标准品，以便快速、灵敏、可靠地检测与HHV-8相关疾病患者的病毒载量。方法提取HHV-8基因组DNA，以HHV-8ORF26为目的基因设计引物，进行PCR扩增；纯化目的片段与pMD19-TVector连接并转化到大肠杆菌中；提取重组质粒DNA，并行PCR、测序鉴定，计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品，实时荧光定量PCR（Real-timeFQ-PCR）构建标准曲线。结果HHV-8ORF26目的片段制备成功，获得稳定的重组质粒，保证了目的片段的特异性和序列完整性，标准曲线参数良好，外标准品阈值循环数（Ct）与其相应梯度稀释浓度呈良好的线性关系，扩增效率高。结论成功构建了HHV-8的Real-timeFQ-PCR外标准品，可以快速检测样品中的HHV-8载量。

关键词：人类疱疹病毒 人类疱疹病毒8型基因 质粒标准品 实时荧光定量pcr 卡波西肉瘤 

单位：石河子大学医学院 新疆石河子832000 新疆维吾尔自治区人民医院