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实时荧光PCR法快速检测耐热霉菌费氏新萨托菌

张慧 郑晓冬 姜侃 汪新 陈小珍 食品与机械 2013年第03期

摘要:费氏新萨托菌是果蔬汁中易污染的耐热霉菌之一,根据Genbank公布的beta-tubulin基因序列,设计引物和探针,对实时荧光PCR的扩增反应体系进行优化。结果表明:1.2μL ROX染料(10μΜ)、2.5μL MgCl2(25mM)、0.2μLDNA聚合酶(5U/μL)、2.0μL dNTP混合物(2.5 mM)、2.5μL 10×PCR反应缓冲液为最佳反应体系;考察实时荧光PCR方法的灵敏度和特异性,基因组DNA的灵敏度为8.6×10-4 ng/反应体系,检测特异性好。该方法可实现耐热霉菌费氏新萨托菌的快速检测。

关键词:耐热霉菌费氏新萨托菌实时荧光pcr快速检测

单位:浙江省质量检测科学研究院理化分析检测部 浙江杭州310013 浙江大学生物系统工程与食品科学学院 浙江杭州310058

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