摘要：[目的]克隆烟草液泡转化酶抑制子基因,并在马铃薯中表达,从而抑制低温贮藏块茎还原糖积累,提高马铃薯加工品质.[方法]通过RT-PCR法分离Nt-VIF全长cDNA,转化马铃薯植株,PCR、Northern杂交和Southern杂交检测转基因植株,转基因植株块茎在低温和常温条件下贮藏30 d,分析转化酶活性与还原糖含量.[结果]克隆到Nt-VIF全长cDNA,35S调控下正向的Nt-VIF基因cDNA已经成功转入鄂马铃薯3号（E3）植株.转基因植株块茎在4℃和20℃贮藏30 d表明,VI活性受温度调节,高温贮藏块茎的VI活性显著低于低温贮藏的块茎,且高温条件下转基因块茎与对照无显著差异,而低温条件下转基因块茎的VI活性与对照相比下降幅度为22.7%（株系A-3）～78.1%（株系A-31）.转基因块茎还原糖（RS）含量在高温贮藏条件下与对照差异亦不明显,而低温贮藏条件下RS含量下降幅度为20%（株系A-17）～80.5%（株系A-30）.进一步分析还表明,转基因块茎低温贮藏其液泡转化酶活性与还原糖含量呈显著正直线相关（RS = 0.289VI ＋ 0.0736）.[结论]Nt-VIF基因的表达显著抑制了马铃薯液泡转化酶活性,导致还原糖积累降低.

关键词：马铃薯 低温糖化 转化酶抑制子 遗传转化 

单位：国家蔬菜改良中心华中分中心、园艺植物生物学教育部重点实验室、湖北省马铃薯工程技术研究中心、华中农业大学园艺林学学院; 武汉430070