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基于A1cR/aIcA和Ore/1oxP系统的标记基因诱导删除体系

赵青 郭仰东 谢华 马荣才 姚磊 中国农业科学 2011年第17期

摘要:【目的】通过构建能够在植物生长发育阶段经乙醇诱导将选择标记基因删除的载体,消除选择标记基因带来的潜在安全隐患。【方法】利用h1cR/a1cA诱导系统和ere/10xP位点特异性重组系统删除选择标记基因。当外源诱导物乙醇存在时,激活下游伢e的表达。Cre重组酶识别2个同向1oxP位点,剔除位点之间的DN段,包括选择标记基因、A1cR/a1cA系统和Cre/1oxP系统,而目的基因gus在诱导前后均为组成型表达。【结果】拟南芥转基因植株受乙醇诱导严格控制0B表达的“开”和“关”。经诱导的转基因植株不能在选择培养基上继续生长。分子生物学检测显示,2个同向1oxP位点间序列均已删除,表明标记基因删除效果明显。【结论】基于h1cR/a1cA和ere/1oxP系统的标记基因诱导删除体系切实可行,有广泛的应用前景。

关键词:删除选择标记基因

单位:中国农业大学农学与生物技术学院 北京100193 北京市农林科学院农业生物技术研究中心 北京100097 北京市农业局 北京100029

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