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甘蔗可溶性酸性转化酶(SoSAI1)基因的克隆及表达分析

牛俊奇 王爱勤 黄静丽 朱惠 李杨瑞 杨丽涛 中国农业科学 2013年第24期

摘要:【目的】克隆甘蔗可溶性酸性转化酶基因(SoSAI1)全长eDNA序列和5’侧翼启动子序列,并分析其序列特征和基因表达模式。【方法】利用RACE技术克隆SoSAI1的全长eDNA序列,应用生物信息学软件分析SoSAll预期编码蛋白特征;采用GenomeIgalking技术克隆勋鲥仃的启动子序列;采用实时荧光定量PCR分析不同生长期SoSAI1在甘蔗叶和茎中的表达,以及PEG6000、100mmol·L-1 NaCl和6℃胁迫下,SoSAI1在甘蔗苗期根和叶中表达模式。【结果】SoSAI1的eDNA序列全长为2387bp,ORF长2058bp,编码685个氨基酸,预测其分子量和等电点分别为74.44kD和5.6,GenBank登录号为JQ406875。5’侧翼启动子序列长417bp,含有胚乳特异表达顺式作用元件和参与干旱诱导的MYB结合位点,GenBank登录号为KC862314。SoSAI1表达在生理成熟期的花序和花序轴中较高,而在成熟茎和老茎中较低。15%PEG和6℃能诱导叶中肋删"表达,而15%PEG和NaCl能诱导根中SoSAll表达。【结论】获得SoSAI1全长cDNA序列和部分启动子序列,SoSAI1在甘蔗生长发育和蔗糖积累,并在应对环境胁迫中发挥作用。

关键词:甘蔗可溶性酸性转化酶基因克隆表达分析

单位:广西大学农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 南宁530005 中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗研究所/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/广西甘蔗遗传改良重点实验室 南宁530007

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