线上期刊服务咨询,发表咨询:400-808-1701 订阅咨询:400-808-1721

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达

张洁; 陈晓敏; 吴锦鸿; 朱重庆; 丁新伦; 吴祖建 中国水稻科学 2017年第03期

摘要:【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Riceraggedstuntvirus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利用大肠杆菌系统表达Pns10蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;通过水稻原生质体病毒侵染体系,利用免疫荧光技术分析Pns10蛋白在水稻原生质体内的分布情况,利用实时定量PCR技术和Westernblot技术分别检测Pns10RNA和Pns10蛋白在水稻原生质体内的积累情况。【结果】将Pns10基因克隆到Gateway系统原核表达载体pDEST17中,IPTG诱导表达成功后,制备融合蛋白抗血清。Westernblot检测显示,该抗血清可检测感病水稻叶片中的Pns10蛋白。病毒侵染水稻原生质体后,Pns10蛋白可形成类似病毒原质的内含体;Pns10RNA在病毒接种8h后开始积累,24h后达到最大值,随后开始下降;Pns10蛋白在24h后开始表达,之后维持较高水平,60h后略有下降。【结论】成功获得了Pns10抗血清;Pns10在水稻原生质体内成功表达,可形成类似病毒原质的内含体,并且Pns10RNA的表达先于其蛋白的表达。

关键词:水稻齿叶矮缩病毒水稻原生质体pns10抗体pns10rnapns10蛋白

单位:福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室; 福州350002

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

中国水稻科学

北大期刊

¥220.00

关注 23人评论|0人关注