摘要：【目的】为了阐明苯酚2-单加氧酶基因(RsPhm)在水稻纹枯病菌(RhizoctoniasolaniAG-1ⅠA)黑化中的功能,【方法】采用常规PCR和RT-PCR技术对该基因进行克隆和生物信息学分析,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测在儿茶酚胁迫下该基因的相对表达量。【结果】生物信息学分析结果表明,RsPhm基因的DNA和cDNA全长序列分别为2628bp和1983bp,编码660个氨基酸。系统进化树分析显示,RsPhm基因在立枯丝核菌(R.solani)不同融合群中具有较近的亲缘关系,在不同真菌之间在进化上具有一定保守性。通过qRT-PCR技术分析了在不同浓度儿茶酚胁迫下水稻纹枯病菌RsPhm基因的转录表达情况。外源儿茶酚能提高RsPhm基因的表达量,在12.5μg/mL浓度下表达量最高,极显著上调35.7倍,在25μg/mL和50μg/mL浓度下表达量分别上调19.1倍和28.4倍,但在100μg/mL浓度下表达量仅上调2.1倍。【结论】获得了RsPhm基因全长序列,了解了其基本生物学信息,明确了其在儿茶酚胁迫下的表达模式。研究结果为科学、系统地阐明水稻纹枯病菌RsPhm基因调控黑色素形成机制奠定了理论基础。

关键词：水稻纹枯病菌 基因克隆 表达分析 

单位：华南农业大学农学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室; 广州510642