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成年 SD 大鼠海马齿状回神经干细胞分离培养和鉴定的改良

孟磊 周文科 金保哲 惠磊 钟根深 李武雄 王仲伟 黄立勇 张新中 中国实用神经疾病 2014年第08期

摘要:目的:改良成年SD大鼠神经干细胞分离、培养及鉴定方法,观察神经干细胞的生长、增殖及分化特点,为后续实验提供细胞。方法从成年SD大鼠分离出完整海马齿状回,采用机械吹打法获得原代细胞,用accutase消化传代,利用cck-8法检测神经干细胞的增殖情况,利用多重免疫荧光细胞化学方法鉴定神经干细胞及其分化细胞。结果机械吹打法可高效获得原代神经干细胞,accutase消化传代更有利于神经干细胞的传代培养,cck-8法简单高效的测定了神经干细胞的增殖,多重免疫荧光创新性的动态展示了神经干细胞经诱导分化后的分化过程。结论改良后的方法可更简单高效的获得和培养出大量细胞,经多重免疫荧光鉴定所分离和培养的细胞是神经干细胞。

关键词:神经干细胞细胞培养成年大鼠免疫荧光细胞化学

单位:新乡医学院第一附属医院神经外科 卫辉 453100

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