摘要：目的 克隆大鼠CYP2J3基因并构建pcDNA3．1（＋）-CYP2J3真核表达我体，检测其在293细胞中的表达。方法 提取大鼠肝脏组织总RNA，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和重叠延伸聚合酶链反应（OE—PCR）扩增大鼠CYP2J3基因，克隆入真核表达我体pcDNA3．1（＋）。脂质体转染293细胞，用Western blotting鉴定其在293细胞表达。结果 运用RT—PCR和OE—PCR获得CYP2J3基因开放读码框架（ORF）全长序列，经酶切鉴定正确。测序结果与基因GenBank提交序列完全一致并成功构建真核表达载体pcDNA3．1（＋）-CYP2J3。Western blotting结果显示，转染pcD—NA3．1（＋）-CYP2J3后的293细胞能稳定有效表达CYP2J3蛋白。结论 大鼠CYP2J3基因的成功克隆以及pcDNA3．1（＋）-CYP2J3载体的成功构建，为CYP2J3基因的功能研究和相关疾病的研究提供了可行的工具。

关键词：cyp2j3 基因克隆 聚合酶链反应 转染 基因表达 

单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院; 武汉430030; 郑州大学第二附属医院急诊科