摘要：目的鉴定结核分枝杆菌异烟肼耐药菌株分泌蛋白中异烟肼耐药相关蛋白.方法应用二乙胺基乙基纤维素(DEAE)亲和凝胶层析,去除结核分枝杆菌7H9培养上清液中牛血清白蛋白.应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)和疏水高效液相色谱技术,分离异烟肼耐药菌株特异蛋白,通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪进行质谱分析,获得肽质量指纹谱,通过蛋白质数据库进行检索分析.结果从3株异烟肼耐药菌株分泌蛋白中可重复检测出一种特异性分泌蛋白,经鉴定为海藻糖磷酸磷酸酶(TPP),分子量为46 000, 等电点为5.3.结论海藻糖磷酸磷酸酶可作为一种快速检测异烟肼耐药结核分枝杆菌的血清学标志物和抗结核药物的靶位.

关键词：异烟肼 结核分枝杆菌 分泌蛋白 耐药菌株 磷酸酶 

单位：200433; 上海; 国家遗传工程重点实验室; 复旦大学生命科学学院遗传学研究所; 上海市肺科医院