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香烟对气道上皮细胞表达4-羟基壬烯醛的影响以及银杏内酯B的干预作用

于亮; 冉丕鑫 中华结核和呼吸 2006年第04期

摘要:目的 探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对人类支气管上皮细胞系(16-HBE)表达4-羟基壬烯醛(4-HNE)的影响以及银杏内酯B的干预作用;并观察4-HNE对中性粒细胞的趋化作用。方法采用免疫细胞化学和Western blot方法。(1)不同浓度(1、10μg/ml CSC)CSC刺激16-HBE细胞4h后4-HNE加成蛋白的表达水平,设正常对照组(无血清培养基代替CSC);(2)10μg/ml CSC刺激不同时间(1、4、8、12、24、30h)后。16-HBE中4-HNE加成蛋白的水平,设正常对照组(无血清培养基代替CSC);(3)用100μmol/L银杏内酯B孵育16-HBE后,CSC刺激1、4、8、12h,检测4-HNE加成蛋白表达的变化,设正常对照组(无银杏内酯B孵育);(4)以趋化实验检测0.1、1、10μmol/L 4-HNE对兔中性粒细胞的趋化作用。结果(1)1、10μg/ml CSC刺激4h后,16-HBE细胞表达4-HNE加成蛋白水平(免疫化学为2.12±0.38、2.69±0.42,Western blot为100.2±6.3、72.3±6.1)均较正常对照组显著增加(免疫化学为1.25±0.37,Western blot为122.4±4.2,P均〈0.01)。(2)10μg/ml CSC刺激1、4、8、12、24、30h后,16-HBE细胞表达4-HNE加成蛋白(免疫化学为2.67±0.46、2.69±0.42、2.71±0.48、2.72±0.56、2.93±0.11、2.92±0.20,Western blot为73.2±8.3,72.3±6.4,72.6±9.2,71.5±8.1,54.4±3.6,56.7±4.4)较正常对照组(免疫化学为1.25±0.35,Western blot为122.4±4.1)显著增加(P均〈0.01),刺激24h和30h,细胞内4-HNE加成蛋白较其他时间点增加。(3)50、100μmol/L银杏内酯B孵育后再以CSC刺激时,16-HBE细胞内4-HNE加成蛋白表达水平(Western blot为84.6±4.4、101.2±4.4)明显低于未以内酯B孵育组,但高于正常对照组(Western blot为72.5±6.4,P均〈0.01)。(4)0.1、1、10μmol/L4-HNE对兔中性粒细胞趋化数目(92±12、104±16、1

关键词:银杏内酯b中性粒细胞吸烟

单位:广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所; 510120

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