摘要：目的探讨中性粒细胞弹力蛋白酶（NE）诱导气道黏液高分泌的上游信号调节机制。方法体外培养人气道BEAS-2B上皮细胞，将细胞分为空白对照组（不加任何刺激）、NE组（NE刺激）、NE＋PP2组（NE刺激合并c—src抑制剂PP2）、NE＋c—src siRNA组（NE刺激合并c—src siRNA）、NE＋Nox1 siRNA组[NE刺激合并NADPH氧化酶1（Nox1）siRNA]、阴性siRNA对照组（加入阴性对照siRNA）及NE＋阴性siRNA组（NE刺激合并阴性对照siRNA）为干预条件。检测干预前后各组细胞中活性氧含量、Nox1蛋白含量、黏蛋白5AC的蛋白及mRNA水平。用四甲基偶氮唑盐法测定各组细胞活性；活性氧试剂盒测定活性氧相对含量；逆转录PCR法检测各组黏蛋白5AC mRNA水平；ELISA法分析细胞黏蛋白5AC的蛋白相对含量；Western blot法检测Nox1蛋白及c—src蛋白的相对含量。结果NE组细胞中Nox1蛋白相对含量为0．88±0．12，高于空白对照组的0．32±0．09（t=9．12，P=0．003）；活性氧相对含量为0．76±-0．09，高于空白对照组的0．18±0．02（t=9．44，P=0．003）；黏蛋白5AC蛋白相对含量为0．82±0．09，基因转录水平为0．77±0．05，均高于空白对照组（分别为0．21±0．11和0．18±0．08，t值分别为7．75和6．13，P值分别为0．004和0．006）。NE＋c—src siRNA组细胞的Nox1蛋白相对含量（0．39±0．08）、活性氧相对含量（0．29±0．05）均低于NE组（t值分别为5．43和5．60，均P=0．007）；黏蛋白5AC蛋白相对含量（0．38±0．09）及mRNA水平（0．41±0．04）低于NE组（t值分别为5．28和4．09，P值分别为0．008和0．034）。NE＋PP2组活性氧相对含量为0．41±0．11，Nox1蛋白相对含量为0．44±0．05，黏蛋白5AC蛋白及mRNA水平分别为0．48±0．08和0．46±0．07，均低于NE组（均P〈0．05）。NE＋Nox1 siRNA组中活性氧相对含量（0．19±0．06）、黏蛋白5AC蛋白相对含量（0．31±0．05�

关键词：黏蛋白类 活性氧 自细胞弹性蛋白酶 nadph氧化酶 src族激酶类 

单位：重庆医科大学附属第二医院呼吸内科 400010