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结核分枝杆菌phoS2基因在大肠埃希菌中的高效表达及其产物抗原性分析

苏锐 李邦印 王臻 王仲元 程小星 张灵霞 李国利 中国防痨 2009年第07期

摘要:目的在大肠埃希菌中高效表达结核杆菌phoS2,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。方法采用DNA重组技术构建结核分枝杆菌phoS2抗原表达载体,用双酶切和PCR等方法鉴定转化子,重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达phoS2;用SDS—PAGE初步鉴定其表达量;将表达产物进行纯化;重组蛋白用Western blot分析其抗原性和特异性。结果phoS2基因在大肠埃希菌中得到高效表达,表达量占全菌蛋白的40%以上;重组蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应。结论重组phoS2蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体形式表达,有很好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值。

关键词:大肠杆菌磷酸转运蛋白质类重组蛋白质类

单位:第四军医大学研究生院 西安710032 解放军总医院第二附属医院结核病研究所 北京100091 中牧实业股份有限公司江西生物药厂 南昌330200

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