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慢病毒介导VEGF165转染的内皮祖细胞移植可减轻大鼠ALI

何招辉; 贺慧为; 卢院华; 陈志; 徐芳华; 王荣胜; 杨春丽 中华危重病急救医学 2017年第11期

摘要:目的 探讨慢病毒介导血管内皮生长因子165(VEGF165)转染的内皮祖细胞(EPCs)移植在大鼠急性肺损伤(ALI)中的保护作用.方法 分离培养雄性SD大鼠单核细胞获得EPCs备用.构建携带人VEGF165基因的慢病毒载体.按随机数字表法将90只雄性SD大鼠分为ALI模型组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EPCs干预组、空载质粒EPCs干预组、VEGF165转染EPCs干预组,每组再分为4、12、48 h 3个时间点亚组,每个亚组6只.经尾静脉注射0.15 μL/g油酸建立大鼠ALI模型;各干预组经尾静脉相应给予PBS、EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs各0.2 mL(含细胞数1×106).分别于各时间点取大鼠腹主动脉血进行血气分析;取左肺组织计算肺湿/干重比值(W/D),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)、VEGF165表达;苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分.结果 与ALI模型组比较,EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs治疗组4 h开始动脉血氧分压(PaO2)明显升高,肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达均明显下降,VEGF165表达明显升高.与EPCs干预组比较,VEGF165转染EPCs干预组PaO2升高、肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达下降、以及VEGF165表达升高均随时间延长更加显著〔4 h:PaO2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)为82.84±10.69比72.34±9.36,肺W/D为4.83±0.23比5.55±0.37,iNOS(ng/mg)为8.77±1.10比14.84±1.34,ET-1(ng/mg)为103.41±5.66比153.08±5.12,VEGF165(ng/mg)为130.56±12.16比83.03±5.95;12 h:PaO2(mmHg)为91.67±6.81比78.50±8.81,肺W/D比值为4.44±0.35比5.32±0.25,iNOS(ng/mg)为7.23±0.24比14.04±1.18,ET-1(ng/mg)为91.98±3.52比125.99±7.55,VEGF165(ng/mg)为164.49±5.71比96.61±6.12〕;48 h个别指标达到谷值或峰值〔肺W/D:4.26±0.30比4.89±0.15,iNOS(ng/mg):5.79±0.85比12.72±1.10,ET-1(ng/mg):74.53±7.10比108.33±5.84,VEGF165(

关键词:血管内皮生长因子内皮祖细胞急性肺损伤慢病毒细胞转染

单位:江西省人民医院重症医学科; 江西南昌330006; 江西省人民医院病理科; 江西南昌330006

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