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半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定

陈丽萍 赵春贞 史文珍 戚玲玲 卢韵碧 张咏梅 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 浙江大学学报·医学版 2009年第06期

摘要:目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。

关键词:受体半胱氨酰白三烯受体cyslt2受体多克隆抗体

单位:浙江大学医学院药理学系 浙江杭州310058 衢州职业技术学院医学系机能教研室 浙江衢州324000 杭州师范大学基础医学院药理学教研室 浙江杭州310036 浙江大学医学院免疫研究所 浙江杭州310058

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