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人类免疫缺陷病毒储存库评估测定技术研究进展

周琦惠; 朱彪 浙江大学学报·医学版 2016年第03期

摘要:HIV整合至CD4+T细胞、脾脏、淋巴结、胃肠相关淋巴组织中,成为HIV潜伏感染的储存库。学界提出“shock and kill”的治疗策略,即先激活释放再杀灭病毒。而实施该策略的前提是评估和测定HIV储存库的大小。本文介绍目前常用的测定HIV储存库方法如Alu-gagPCR、定量病毒产物分析及tat/rev诱导有限稀释法。Alu.gagPCR可区别整合与未整合病毒基因,但不能区分缺陷与有功能的前病毒,因此易高估储存库。定量病毒产物分析在纯化静止CD4+T细胞中进行,被誉为HIV储存库检测的“金标准”,但实验成本高,技术要求高,所需标本量大,仅由一轮激活并不能完全诱导产物释放,因此会低估储存库。Tat/rev诱导有限稀释法主要测定经由刺激物诱导表达多拼接RNA等生物学标志的潜伏感染细胞频数,具有所需血标本少,不用抽提病毒RNA,实验时间短,对于不同大小储存库都适用等优点,但可能高估潜伏储存库。

关键词:hiv聚合酶链反应基因产物tat基因

单位:浙江大学医学院附属第一医院感染病中心传染病诊治国家重点实验室感染病诊治协同创新中心; 浙江杭州310003

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