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超声破碎变异链球菌后蛋白质提取条件的优化研究

刘果 何永红 万呼春 钟晓波 齐进 重庆医学 2012年第29期

摘要:目的寻找超声破碎后高效率提取致龋菌变异链球菌蛋白质的最佳放置时间。方法以裂解液为提取介质,采用超声法破碎细菌。对比破碎前、后菌形态并将菌提取液分别放置0、10、30、50、70min收集蛋白上清液,通过RcDc法测定蛋白质浓度及蛋白质SDS-PAGE电泳,比较放置不同时间后的蛋白质提取效果。结果超声破碎后,少部分细菌破碎不完全。RCDC法测定结果显示,超声破碎后放置30min时提取的蛋白质浓度高于其他各组(P〈0.05),但SDS-PAGE电泳显示蛋白质的条带分布和丰度无明显差别,推测蛋白质的释放和溶解需要一定时间完成。结论超声法提取变异链球菌蛋白质后放置30min可显著提高蛋白质提取效率。

关键词:链球菌变异蛋白质超声

单位:重庆医科大学附属口腔医院 400015 口腔疾病研究国家重点实验室/四川大学 成都610041 四川大学华西口腔医院内科 成都610041

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