摘要：针对旱稻在基因工程中转化效率低这一难题,以4个旱稻品种为对象,对农杆菌介导的遗传转化的各个步骤进行了优化试验,结果表明NB（N6 macro elements;B5 microelements and vitamins;proline 500mg L^-1,L-Glutamine 500mg L^-1,casamino acid 300mg L^-1,sucrose 30 gL^-1,2,4-D2mg L^-1,agar8g L^-1,pH5.8）培养基适合于旱稻愈伤组织诱导;AAM-AS（Na2HPO4.2H2O339.2mg L^-1;KCl2.95g L^-1;MgSO4·7H2O500mg L^-1;CaCl2114.4mg L^-1;MnSO4·4H2O10mg L^-1;H3BO33mg L^-1;ZnSO4·7H2O2mg L^-1;KI0.75mg L^-1;NaMO40.25mg L^-1;CuSO4.5H2O0.0387mg L^-1;CoCl2.6H2O0.025mg L^-1;VB10.5mg L^-1;VB60.5mg L^-1;烟酸0.5mg L^-1;肌醇100mg L^-1;甘氨酸7.5mg L^-1;精氨酸174mg L^-1;谷氨酰铵876mg L^-1;casamino acid 500mg L^-1;蔗糖68.5g L^-1;葡萄糖35g L^-1;AS200μmol L^-1pH5.2）是农杆菌的最佳重悬液;对NPT（new plant type,NPT）这种侵染后易水渍化品种,滤纸法共培养可将其抗性愈伤发生率提高15倍以上;筛选及分化前对抗性愈伤组织进行2d的干燥培养可显著加快愈伤组织分化进程;在分化培养基中加入AgNO3有助于提高分化率;而短期高浓度的CuSO4处理可显著提高分化率。利用此体系获得了一大批PCR鉴定阳性的转基因植株;Southern blot检测证明外源基因大多数以单拷贝形式整合在转基因植株中。

关键词：旱稻 农杆菌转化 共培养 分化 

单位：中国农业大学农学与生物技术学院; 北京100094; 中国农业科学院作物科学研究所; 北京100081; 山西农业大学; 山西太谷030801; 北京师范大学学报（自然科学版）编辑部; 100875