摘要：采用RT-PCR法亚克隆了PD，基因保守区内450bp的靶标序列作为干扰区段，构建了含有内含子hpRNA（ihpRNA）的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI，经农杆菌介导转化日本晴，获得转基因植株；通过在R代对其潮霉素（Hyg）抗性基因的PCR鉴定，确定携带有干扰片段的T-DNA区已整合到水稻基因组中，且在转基因T1代符合3：1的分离模式。半定量PCR和荧光定量PCR的检测结果表明，PDI基因沉默转基因阳性植株不同器官中的PD，表达量均显著降低，尤其是其籽粒中表达量较微，几乎能引起靶基因80％左右沉默。对转基因T2代植株的高温结实特性和籽粒理化品质的检测结果，PDI基因沉默会引起高温胁迫处理下结实率的大幅度降低，耐热性显著下降，但其在常温处理下的结实率与对照之间无显著差异。此外，PDI基因沉默后，稻米的透明度下降、垩白度增加，但对籽粒粗蛋白总量和直链淀粉含量的影响不甚明显。

关键词：水稻 蛋白二硫键异构酶 基因沉默 rnai载体构建 高温胁迫 

单位：浙江大学农业与生物技术学院; 浙江杭州310058