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超声微泡破裂法促进骨形态发生蛋白-2在大鼠骨髓间充质干细胞表达的研究

刘永恒; 王东; 李岩; 段志青; 郭丽 中国继续医学教育 2016年第08期

摘要:目的探讨超声微泡破裂法对基因重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)质粒GV 147-rhBMP 2-GFP在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的转染、表达的促进作用。方法选取8周龄Sprague-Dawley雄性大鼠分离培养BMSCs,传至第3代时胞悬液分为3组:A组(单纯细胞组),B组(质粒组,仅加质粒GV 147-rhBMP 2-GFP)及C组(超声+微泡+质粒组);转染后48 h用倒置荧光显微镜观察质粒转染情况及细胞生长状况,RT-PCR检测细胞转染后的目的基因表达。对数据进行分析。结果 48 h后可在倒置荧光显微镜下,观察到质粒组及超声+微泡+质粒组部分细胞胞浆内发出绿色荧光,其中单纯细胞组未见绿色荧光,超声+微泡+质粒组的绿色荧光表达量高于B组;RT-PCR检测显示C组BMP-2基因m RNA相对表达量较B组高。结论超声微泡破裂法能增加外源性rhBMP-2基因在大鼠骨髓间充质干细胞转染率和表达水平,有望为骨折的基因治疗提供一种新型方法。

关键词:超声微泡基因治疗骨髓间充质干细胞

单位:山西医科大学; 太原030001; 山西医科大学第二医院骨科; 太原030001; 山西医科大学第二医院骨与软组织损伤修复山西省重点实验室; 太原030001

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