摘要：【目的】了解小麦内生固氮菌数量,筛选具有ACC（1-aminocyclopropane-1-carboxylate,1-氨基环丙烷-1-羧酸）脱氨酶活性的小麦内生固氮菌,确定筛选菌株的系统发育地位与分类地位,为微生物肥料生产收集菌种资源。【方法】样品表面灭菌后采用无氮培养法筛选内生固氮菌,乙炔还原法测定菌株固氮酶活性;采用ACC唯一氮源法筛选ACC脱氨酶阳性菌,比色法定量测定ACC脱氨酶活性;PCR扩增得到菌株16S rDNA,通过序列测定和相似性分析研究菌株的系统发育;通过形态、生理生化特征和16S rDNA序列比对鉴定菌种。【结果】小麦体内固氮菌数量为（0.2—17.8）×105cfu.g-1鲜重;分离到小麦内生固氮菌60株,固氮酶活性在1—36 nmol C2H4/h.mg蛋白,其中9株具有ACC脱氨酶活性,活性在0.87—9.32μmolα-丁酮酸/h.mg蛋白;新分离菌株9136固氮酶活性为1.82 nmol C2H4/h.mg蛋白,ACC脱氨酶活性为9.32μmolα-丁酮酸/h.mg蛋白,初步鉴定为假单胞菌Pseudomonassp.。【结论】田间自然生长的小麦体内有大量固氮菌,数量在105cfu.g-1鲜重,其中部分菌株具有ACC脱氨酶活性,个别菌株具有较高的ACC脱氨酶活性,可能对作物抵御不良环境具有作用。

关键词：小麦 内生固氮菌 acc脱氨酶 根际促生细菌 

单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所／农业部作物营养与施肥重点实验室 北京100081