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中华蜜蜂化学感受蛋白基因家族克隆及表达特征分析

倪翠侠 张林雅 李红亮 商晗武 中国农业科学 2013年第08期

摘要:[目的]完成中华蜜蜂(Apis cerana cerana)化学感受蛋白(chemosonsoryproteins,CSPs)基因家族的序列及表达谱鉴定,解析中蜂整个CSPs家族的表达特征与分布规律,为中蜂CSPs的生物学功能研究提供参考。[方法]利用RT—PCR技术扩增,克隆获得中蜂CSPs基因家族全部6条基因序列的开放阅读框(ORF)全长,并利用re&1-timePCR技术对中蜂所有的CSPs序列在中蜂工蜂不同发育历期及不同器官表达特征进行研究。[结果]新克隆4条基因(Ac-CSP2、Ao-CSP4、Ac-CSP5和Ac-CSP6)的开放阅读框分别为354、387、315和378bp,分别编码117、128、104和125个氨基酸残基,预测蛋白质分子量分别为13.01、14.61、12.46和14.63kD,等电点分别为8.86、4.53、9.60和8.71,且均具有4个保守的半胱氨酸残基,均符合昆虫CSPs的一般生化特征。中蜂与意蜂CSPs同源基因家族间具有高达95%--99%的相似性。CSPs在中蜂不同发育时期及器官的表达特征结果显示,Ac-CSPl、2、3、4在卵、幼虫和蛹期几乎不表达,其中Ac-CSPI、2、4在触角中表达量最高,而Ac--CSP3在翅中表达量最高;Ac-CSP5在中蜂各个发育历期的表达量几乎相同;Ac-CSP6蛹期有较高表达,其余时期不表达。[结论]中蜂CSPs基因家族所有6个基因的氨基酸序列与意大利蜜蜂有较高的相似性,但二者各基因的表达谱在整体相似的情况下局部又存在着某些差异,为进一步研究该家族蛋白的生理功能机制奠定了良好基础。

关键词:中华蜜蜂化学感受蛋白克隆dna序列分析表达谱

单位:中国计量学院生命科学学院、浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 杭州310018

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