摘要：【目的】获得中华稻蝗（Oxya chinensis）几丁质酶基因10（OcCht10）的cDNA序列，预测其功能域，并做聚类分析明确该基因的系统发育关系。绘制OcCht10在5龄若虫不同组织部位和发育时间的表达图谱，研究其在中华稻蝗蜕皮过程中的生物学功能，为害虫防治提供高效安全的候选基因。【方法】从中华稻蝗转录组数据库搜索OcCht10 cDN段，经过blast分析、比对、拼接后，翻译为氨基酸序列，预测其功能域，并与其他昆虫几丁质酶家族基因进行聚类分析，进一步确认该基因的系统发育关系并进行准确命名；选取中华稻蝗5龄第6天不同组织部位及5龄若虫不同天数表皮样本，总RNA提取后反转录为cDNA模板，采用Real-time quantitative PCR（qPCR）方法获得OcCht10在5龄稻蝗若虫不同组织部位和不同发育阶段的表达谱；设计OcCht10 dsRNA引物，用试剂盒体外合成dsOcCht10，采用注射法进行RNA干扰；取注射24 h稻蝗表皮样本，用qPCR方法检测OcCht10基因沉默效率；并仔细观察dsRNA注射后稻蝗表型，统计其死亡率。【结果】经对中华稻蝗转录组数据库的搜索，获得OcCht10 cDN段长度为9 318 bp，开放阅读框为8 613 bp，编码2 870个氨基酸；其3′非编码区为705 bp，推测OcCht10 5＇端有500多碱基尚未获得；预测其氨基酸序列具有多个结构域，包含有5个几丁质酶催化域和6个几丁质结合域；与其他昆虫几丁质酶基因聚类分析结果显示OcCht10属于昆虫几丁质酶家族基因Ⅱ组，该组基因与昆虫蜕皮相关；5龄若虫组织特异性分析表明该基因主要在表皮、前肠和后肠等外胚层发育而成的组织器官中表达，提示OcCht10可能参与表皮几丁质代谢；发育时间表达图谱表明该基因在5龄第6—7天，即蜕皮前的表皮中高表达，表明OcCht10可能负责蜕皮时表皮几丁质降解；5龄若虫第2天注射该基因的dsRNA，24 h后取表�

关键词：中华稻蝗 几丁质酶基因 实时定量pcr rna干扰 

单位：山西大学应用生物学研究所 太原030006 山西省农业科学院生物技术研究中心 太原030031