摘要:应用生物信息学软件DNAStar、DNAMAN及Bepipredi线性表位预测(http://tools.immu nee pitope.org/tools/bcell/iedb-input)在线工具对草莓皱缩病毒(Strawberry Crinkle Virus,SCV)78kDa外壳蛋白的氨基酸序列进行了分析,选择了一段抗原表位预测较强的27氨基酸残基的区段(S3)。依据大肠杆菌的密码子偏好性化学合成了编码S3区段的DN段并克隆至大肠杆菌表达载体pET32a(+)中,序列分析确定了含正确插入片段的重组质粒pET32a(+)-S3。转化上述重组质粒至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中并诱导重组蛋白表达。表达产物经SDS-PAGE分析表明,受IPTG诱导表达的重组蛋白与所构建的重组蛋白的分子量一致。
关键词:草莓皱缩病毒 抗原表位预测 基因克隆 基因表达
单位:兰州理工大学生命科学与工程学院
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