摘要：目的构建组织蛋白酶L（CTSL）基因的真核表达质粒，通过体外实验研究CTSL基因与卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞侵袭、转移的关系。方法采用逆转录（RT）-PCR技术从卵巢癌组织总RNA中扩增CTSL基因的cDNA全长，克隆至pMD18-T载体上；酶切、纯化CTSL基因后与pcDNA3．1载体连接，构建重组真核表达质粒pcDNA3．1-CTSL。应用脂质体介导的基因转染技术将重组质粒转染卵巢癌H08910细胞，RT—PCR技术和蛋白印迹法分别检验CTSLmRNA和蛋白的表达情况，细胞增殖能力测定分别采用四甲基偶氮唑蓝法和集落形成实验，细胞周期检测、细胞体外侵袭、转移、黏附能力测定分别采用流式细胞仪、细胞体外侵袭重建基底膜实验、穿膜小室（trans well小室）实验、体外黏附实验。结果RT—PCR和蛋白印迹法结果证实，HO8910细胞转染pcDNA3．1-CTSL质粒后有CTSL基因和蛋白的表达。HO8910-CTSL细胞的生长速度加快，但与对照的HO8910-pcDNA3．1及HO8910细胞分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。HO8910-CTSL细胞的S＋G2＋M期细胞比例为37．9％，与HO8910-pcDNA3．1细胞及HO8910细胞（分别为32．9％、31．8％）比较虽有增加，但差异均无统计学意义（P〉0．05）。HO8910-CTSL细胞的侵袭、转移能力增加（分别为0．34±0．18、1．252±0．114），与HO8910-pcDNA3．1细胞（分别为0．17±0．04、0．486±0．027）及HO8910细胞（分别为0．16±0．05、0．459±0．674）分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；HO8910-CTSL细胞的黏附能力（0．16±0．04）与HO8910-pcDNA3．1细胞（0．19±0．04）及H08910细胞（0．19±0．03）比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论CTSL基因真核表达质粒转染使卵巢癌细胞的体外侵袭和转移能力增加，有可能成为抗卵巢癌侵袭和转移的分子靶点。

关键词：卵巢肿瘤 组织蛋白酶l 肿瘤浸润 肿瘤转移 

单位：广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科 南宁530021