摘要:目的研究大鼠急性肺栓塞(APE)后肺组织中线粒体前凋亡蛋白(ARTS)的表达变化及其诱导的细胞凋亡。方法采用自体血栓栓塞颈总动脉制备大鼠APE模型。分别在APE前(对照)和APE后1、8、24和48h开胸取肺脏。常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ARTS mRNA表达水平,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)进一步验证ARTS以及ARTS诱导凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xL、XIAP和H2Ax的表达变化,用免疫组化法检测肺组织中ARTS在APE前后的表达变化及其组织分布情况,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织内细胞凋亡情况。结果APE后ARTS的mRNA及蛋白表达水平均升高,于1h和48h升高最明显(P〈0.05或P〈0.01)。免疫组化显示ARTS在APE前肺组织内表达量很低,不易检测;APE后48h ARTS表达明显升高,主要分布在支气管黏膜上皮细胞和肺泡上皮细胞。TUNEL染色发现,随着ARTS表达升高,肺组织出现明显的细胞凋亡现象,同时ARTS诱导凋亡系统中凋亡抑制蛋白Bcl-2、Bcl-xL和XIAP的表达下降,凋亡标记蛋白H2Ax表达升高(P〈0.05或P〈0.01)。结论大鼠APE后肺组织内ARTS表达明显升高,ARTS介导的凋亡系统在APE后细胞凋亡中发挥了重要作用。
关键词:肺栓塞 急性 蛋白质免疫印迹法 细胞凋亡 线粒体凋亡蛋白
单位:第四军医大学西京医院呼吸科 陕西西安710033
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