摘要：目的观察人肿瘤坏死因子-α（TNF—α）对人血管内皮细胞（EA．hy926）单层通透性的影响，并初步探讨其作用机制。方法在培养的EA．hy926融合成单细胞层后，加入5、10、20／zg／LTNF—α培养24h，或加入10μg／LTNF—α培养6、12、24h，测定异硫氰酸荧光素（FITC）标记的葡聚糖（Dextran）荧光强度以表示人血管内皮细胞单细胞层的通透性大小；用激光共聚焦显微镜观察内皮细胞肌动蛋白骨架[纤维状肌动蛋白（F—actin）]和紧密连接蛋白（zO一1）的形态分布；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测ZO-1的表达。结果与空白对照组比较，TNF—α能明显增加内皮细胞的通透性，诱导F—actin的重新分布以及应力纤维的形成和ZO-1的排列紊乱，数量减少，细胞间裂隙形成增多。Western blotting表明，TNF—α呈剂量和时间依赖性的方式减少ZO—1表达。结论TNF—α诱导内皮细胞通透性增高与其破坏内皮细胞屏障功能完整性有关。

关键词：肿瘤坏死因子 血管内皮细胞 通透性 肌动蛋白 紧密连接 

单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院外科ICU 200025