摘要：目的：模拟临床脓毒症继发感染的发病情况，构建“二次打击”动物模型，评价“二次打击”对机体损害及免疫功能的影响。方法81只雄性SD大鼠按随机数字表法分组，其中45只分为单纯脓毒症组及脓毒症继发肺炎4 d、7 d组，每组15只，用于观察生存情况；另外36只分为正常对照组，单纯脓毒症1、4、7 d组，脓毒症继发肺炎4 d、7 d组，每组6只，用于指标检测。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型；于CLP术后4 d或7 d分别经鼻腔注射肺炎链球菌（含菌量1×1010 cfu/mL）继发肺部感染构建“二次打击”模型。分别于相应时间点以及给菌后1 d处死大鼠，收集血液及脾脏组织，进行外周血菌落计数、脾脏细胞计数，检测血清生化指标及相关细胞因子水平，观察脾脏病理改变及细胞凋亡情况。结果①与单纯脓毒症组同期比较，脓毒症继发肺炎4 d组大鼠存活数明显减少（只：4比11，χ2＝6.533，P＝0.011），而7 d组则差异无统计学意义（只：9比11，χ2＝0.600，P＝0.439）。②单纯脓毒症组术后1 d外周血菌落计数、生化指标均明显升高，随后逐渐下降；术后4 d时脾脏免疫细胞计数已明显低于1 d〔树突细胞（DC）：（0.69±0.09）%比（0.87±0.31）%， CD4＋ T细胞：（21.05±2.89）%比（24.84±4.59）%，CD8＋ T细胞：（10.62±1.79）%比（13.40±1.31）%，均P＜0.05〕，而调节性T细胞（Treg）明显高于正常对照组〔（3.14±0.74）%比（2.87±1.08）%，P＜0.05〕；术后7 d血生化指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）较1 d明显下降〔ALT（U/L）：35.33±11.52比81.00±38.40，AST（U/L）：70.33±42.16比156.00±28.11，BUN（mmol/L）：5.30±2.27比9.13±4.04，SCr（μmol/L）：55.33±10.67比96.67±45.79，均P＜0.05〕；血清促炎因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-1β）

关键词：脓毒症 动物模型 免疫麻痹 

单位：厦门大学附属中山医院肾内科 上海交通大学医学院附属第九人民医院肾脏科 200011