摘要:目的克隆人高血糖素原基因(proglucagon cDNA,PGcDNA),构建其真核表达质粒载体。方法从人切除脑组织中提取总RNA,并分离mRNA,经过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出PGcDNA,并将其插入经BamHI和EcoRI双酶切的真核表达质粒载体pVITR03中,构建重组质粒载体pVITR03-PGcDNA。结果经过限制性酶切鉴定和测序证明,PGcD—NA全长543bp,编码181个氨基酸,并已插入到pVITR03中。结论成功获得了PGcDNA,构建了含PGcDNA的真核表达质粒载体,为研究重组PG的功能奠定了基础。
关键词:高血糖素原 聚合酶链式反应 基因表达
单位:第三军医大学新桥医院麻醉科; 重庆400037; 第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所; 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室; 重庆400038; 第三军医大学新桥医院心内科; 重庆400038
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