摘要：目的探讨肿瘤来源血管内皮细胞的诱导和体外培养方法，并对其进行细胞生物学特性鉴定。方法胰蛋白酶灌流消化法收集人脐静脉内皮细胞（HUVEC），采用肿瘤细胞的培养上清液诱导HUVEC增殖，制备肿瘤衍生的血管内皮细胞（Td—EC）。采用形态学观察和荧光染色Ⅷ因子相关抗原，鉴定血管内皮细胞，用RTPCR检测肿瘤血管内皮细胞标志物（TEM）的表达，采用迁徙试验、透射电镜、流式细胞仪细胞周期分析等方法检测、比较HUVEC和Td—EC的生物学特性。结果原代培养的HuVEC约于24h完全贴壁，4～5d后融合成单层铺路石样结构。Ⅷ因子荧光染色证实培养的细胞是HUVEC。经肿瘤细胞上清液诱导后，用RT-PCR检测到TEM1和TEM8 mRNA在Td—EC中的表达；Td—EC细胞迁徙能力较HUVEC显著增强；Td—EC细胞增生活跃，G0～S期细胞比例明显增高，具有肿瘤血管内皮细胞特性。结论胰蛋白酶灌流消化法可获得大量连续传代扩增的HUVEC，并可诱导生成肿瘤源性的血管内皮细胞。

关键词：人脐静脉内皮细胞 肿瘤内皮抗原 细胞迁徙 

单位：第三军医大学大坪医院胸心外科中心 重庆400042